96孔細胞培養板使用與維護方法

　　96孔細胞培養板使用與維護方法

以下是關(guān)于96孔細胞培養板使用與維護方法的專(zhuān)業(yè)指南：

一、細胞接種操作規范

細胞預處理‌

選擇狀態(tài)良好的細胞(瓶底密度80%為佳)，消化時(shí)先用PBS或無(wú)血清培養基沖洗‌

使用0.25%胰酶消化2-3分鐘，不同細胞類(lèi)型需調整時(shí)間‌

終止消化后需吹打成單細胞懸液(建議用培養基稀釋而非血清)‌

　　接種技巧‌

每孔加入100μL細胞懸液，從孔左側底部緩慢加樣‌

加完半板后需重新混勻懸液再繼續加樣‌

加樣后輕敲培養板四邊(順時(shí)針?lè )较蚯脫?次/邊)‌

二、培養環(huán)境控制

邊緣效應處理‌

? 周邊孔建議填充PBS或培養基作為緩沖，避免用于關(guān)鍵實(shí)驗‌

? 新型培養板(如Nunc Edge)可通過(guò)蒸發(fā)溝槽設計消除邊緣效應‌

溫濕度管理‌

? 換液時(shí)需預溫培養基(37℃預熱10分鐘)防止細胞脫落‌

? 觀(guān)察細胞時(shí)需注意培養板蓋霧氣干擾(可短暫靜置除霧)‌

三、日常維護要點(diǎn)

操作環(huán)節 注意事項

換液操作‌ 沿孔壁緩慢加液，使用剪尖槍頭避免沖力過(guò)大‌

滅菌處理‌ 聚苯乙烯材質(zhì)耐受γ射線(xiàn)滅菌，但不可高壓滅菌(最高耐溫80℃)‌

儲存條件‌ 未開(kāi)封產(chǎn)品需避光干燥存放(15-25℃)，已開(kāi)封需密封防污染‌

四、特殊應用提示

成像實(shí)驗‌：選擇底部光學(xué)性能優(yōu)異的型號(如ibidi μ-Plate折射率1.52)‌

長(cháng)期培養‌：每48小時(shí)需更換培養基，避免代謝廢物堆積‌

注：細胞密度建議控制在0.5-2×10?/孔，具體需根據細胞類(lèi)型調整‌

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